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  • 名称: 总RNA提取试剂盒
货号:Cat# 082001
规格:50次
价格:592

产品介绍

  

 总RNA提取试剂盒


  . 一步可获得高纯度RNA,无DNA残留

  . 适用于各种生物样本总RNAmiRNA的提取,包括动植物组织、血液、细胞、细菌等



名称

规格

货号

价格

Total RNA Isolation Kit

50/

082001

592







    应用范围:


本产品适用于提取动、植物、昆虫、大型真菌等组织细胞,细菌以及全血总RNA。可快捷、高效的制备高纯度总RNA

 

 

   方法1:动、植物等组织总RNA提取


     1、样本处理

    (1)液氮研磨

   1.5ml 离心管中,提前加入500μl RL Solution备用;取25-100mg动、植物等组织,于研钵中(动物组织剪成小块,易于研磨),加入液氮充分研磨成粉,置于含有RL Solution1.5ml离心管中,充分混匀,进入步骤2

    2)直接研磨

   25-50mg组织,剪成小碎块,置于研钵或研磨器中,加入700μl RL Solution充分研磨(研磨不充分影响 提取效果),吸取500μl 1.5ml离心管中,进入步骤2

  2、加入40μl 氯仿,充分混匀,12000g 4C离心10min

3、小心吸取上清200-300μl于新的1.5ml 离心管中(避免吸入杂质),加入等体积无水乙醇,充分混匀。

      4、将混匀液吸入Spin column管中,12000g离心1min,弃 滤液。

      5、加入600μl Wash Buffer12000g离心1min,弃滤液。

      6、重复步骤5

7、小心取出Spin column(避免沾上滤出液),放入新的无RNA1.5ml 离心管中。

8、吸入50μl RNase free Water,室温放置1-2min后,12000g离心1min,收集滤液,获得总RNA

 

     注意:

       1、组织破碎过程,采用液氮研磨,会有最佳提取效果。注意研磨充分。

       2、直接研磨法操作方便,但研磨不彻底时,会导致RNA一定程度降解。因此,样品

       处理要快速,研磨要充分。直接研磨处理时,注意样品量不多于50mg

  3、样本保存:如需保存样本,步骤1后,暂时或长期存放于-20C-80C更佳),待用时再提取,RNA可保存完好。











   



    方法2:细胞总RNA提取


 

1、离心收集细胞(5102-8),弃上清(上清倒干净),加入500μl RL Solution,用枪头反复吹打细胞,直至全部细胞溶解,吸取全部裂解液于1.5ml离心管中,进入步骤2

  2、加入40μl 氯仿,充分混匀,12000g 4C离心10min

3、小心吸取上清200-300μl于新的1.5ml 离心管中(避免吸入杂质),加入等体积无水乙醇,充分混匀。

4、将混匀液吸入Spin column管中,12000g离心1min,弃滤液。

      5、加入600μl Wash Buffer12000g离心1min,弃滤液。

      6、重复步骤5

7、小心取出Spin column(避免沾上滤出液),放入新的无RNA1.5ml 离心管中。

8、吸入50μl RNase free Water,室温放置1-2min后,12000g离心1min,收集滤液,获得总RNA

 

     注意:

        1、样本保存:如需保存样本,步骤1后,暂时或长期存放于-20C-80C更佳),待用时再提取,RNA可保存完好。



     方法3:血液总RNA提取


 

1、取全血100μl1.5ml 离心管中,加入500μl RL Solution充分混匀,进入步骤2

  2、加入40μl 氯仿,充分混匀,12000g 4C离心10min

3、小心吸取上清200-300μl于新的1.5ml 离心管中(避免吸入杂质),加入等体积无水乙醇,充分混匀。

4、将混匀液吸入Spin column管中,12000g离心1min,弃滤液。

      5、加入600μl Wash Buffer12000g离心1min,弃滤液。

      6、重复步骤5

7、小心取出Spin column(避免沾上滤出液),放入新的无RNA1.5ml 离心管中。

8、吸入50μl RNase free Water,室温放置1-2min后,12000g离心1min,收集滤液,获得总RNA

 

      注意:

   1、全血样本:新鲜血液(抗凝或非抗凝)提取效果最佳。收集1滴(约50-100μl)新鲜血液,直接加入500μl RL Solution,枪头吸打充分

        混匀,进入步骤2;如果血滴已经凝固,则加入500μl RL Solution,枪头反复吸打至血块彻底溶解,进入提取步骤2

   2、血液淋巴细胞RNA的提取: 收集血液淋巴细胞后,请按照方法2:细胞总RNA提取进行提取。

   3、样本保存:如需保存样本,步骤1后,暂时或长期存放于-20C-80C更佳),待用时再提取,RNA可保存完好。

 

RNA提取试剂盒说明书.pdf